帕金森病（Parkinson’s disease, PD）主要影響65歲以上的老年人，發病率約2-3%。PD因較高的發病率、早期診斷困難及治療效果不佳等問題影響國民健康，給患者家庭與社會保障帶來負擔。目前，PD的病因與發病機制尚不明確，但表型清楚。PD的核心症狀為運動遲緩，伴隨靜止性震顫、肌強直與姿勢異常等臨床表現；其典型病理特徵包括中腦黑質緻密區多巴胺能神經元的大量丟失與相關腦區出現磷酸化α-synuclein聚集形成的路易小體。
由於醫學倫理學的限制與實驗風險，操作PD病因並觀察疾病程序的研究不可能在PD患者中開展。目前，可行的最佳方案是藉助與人類行為表現、神經系統結構和功能均高度相似的非人靈長類動物來開展研究。為了探索PD的病因、早期診斷與干預等重要問題，亟須從發病原因和疾病發展過程的角度模擬PD發生的病因性生物醫學模型，而模擬人類PD基因突變的基因編輯PD動物模型是其中之一。神經毒素誘導的經典獼猴模型只能模擬PD的結果，不能從發病原因的角度模擬PD的發生與發展過程，不是病因性模型。因此，建立模擬人類PD病因與病程發展的非人靈長類動物基因編輯的PD模型，將為PD基礎研究、臨床早期診斷與治療的發展提供全新的思路。
中國科學院昆明動物研究所研究員胡新天課題組與中科院腦科學與智慧技術卓越創新中心研究員仇子龍課題組長期合作，將腺相關病毒（Adeno-associated virus, AAV）作為載體工具，結合已知的PD風險基因及其可能的致病機理，利用AAV介導的CRISPR/Cas9技術在成年獼猴黑質區域直接編輯PINK1與DJ-1基因，建成首例成年獼猴基因編輯PD模型（圖1）。結果表明，黑質原位基因編輯的成年獼猴出現了PD核心臨床運動症狀，包括運動遲緩、震顫與姿勢異常等，且老年猴的症狀更嚴重，發病程序更急促，說明基因風險與年齡因素可能共同參與PD的發病過程。病理染色的結果表明，基因編輯引發的黑質多巴胺能神經元丟失超過60%，並出現了磷酸化alpha-synuclein的聚集，很可能是Lewy小體的早期形態。該獼猴模型出現了典型PD病理改變。結合上述經典臨床症狀，建立了首例具備PD核心表型的基因編輯獼猴模型。這一新型病因性獼猴模型將為PD的病因探索、早期標記物發掘以及有效干預與治療策略開發等提供研究平臺。
相關研究成果以Co-editing PINK1 and DJ-1 Genes Via Adeno-Associated Virus-Delivered CRISPR/Cas9 System in Adult Monkey Brain Elicits Classical Parkinsonian Phenotype為題，發表在Neuroscience Bulletin上。復旦大學、雲南大學附屬醫院參與研究。
研究工作得到國家自然科學基金重點研發計劃、廣東省重點領域研發計劃、國家自然科學基金面上專案、雲南省科技廳基礎研究專項等的支援。該工作依託於昆明動物所承擔建設的“模式動物表型與遺傳研究國家重大科技基礎設施（靈長類）”。
AAV9介導的CRISPR/Cas9基因編輯導致成年獼猴出現帕金森病核心表型
來源： 昆明動物研究所
