由於動物體內環境的複雜性,我們在選擇動物體內病毒感染試劑時,會區別於細胞實驗。通常為避免動物產生過激的免疫反應或者死亡,這類病毒感染試劑純度會更高些,並且適配體液環境。因此,針對動物體內病毒感染實驗,則需要適配特定的動物體內病毒感染增強試劑。
發表在《aging》上的一篇題為“Ubenimex induces autophagy inhibition and EMT suppression to overcome cisplatin resistance in GC cells by perturbing the CD13/EMP3/PI3K/AKT/NF-κB axis”的文章描述到:將LV-pEGFP-N1-CD13 質粒(MOI = 60)溶解在慢病毒增強試劑EnvirusTM-LV(Engreen Biosystem Co, Ltd.)中,並靜脈內給藥 12 每次治療前數小時。再過2周,處死小鼠。western blot實驗顯示,CD13蛋白表達水平顯著上調。
同時,發表在《Oncogene》期刊上題目為“Autophagy-dependent generation of Axin2+ cancer stem-like cells promotes hepatocarcinogenesis in liver cirrhosis”文章中表述:將患有異常自噬性肝硬化的大鼠隨機編號並靜脈注射1×109 TU/ml shRNA 載體、shRNA-Atg3、shRNA-Atg7 和 shRNA-HGF 慢病毒轉導增強試劑(Envirus;Engreen Biosystem,北京,中國) 每週兩次,持續4周。發現在轉基因大鼠肝硬化模型中,透過 Atg3- 和 Atg7-shRNA 的轉入,誘導或抑制肝硬化肝臟中的自噬,顯著誘導或抑制 HGF 表達,進而增加或減少 EGFP+CD90+ 的產生。揭示了肝細胞透過啟用或失活 Met/JNK 和 Met/STAT3 訊號,從而促進或防止肝癌的發生。
為避免風險事故發生,病毒感染實驗的操作過程通常防護十分嚴格,能儘快完成實驗是實驗者的共同期盼。因此,在病毒本身表達效率不高的情況下,推薦使用增強試劑,能幫助提高20-50倍的感染效率,大幅度提高實驗成功率,避免二次實驗。
參考文獻:
1.Autophagy-dependent generation of Axin2+ cancer stem-like cells promotes hepatocarcinogenesis in liver cirrhosis
2.Ubenimex induces autophagy inhibition and EMT suppression to overcome cisplatin resistance in GC cells by perturbing the CD13/EMP3/PI3K/AKT/NF-κB axis