1. 什麼是FlashGel閃膠系統?
FlashGel閃膠系統是一個不需要紫外光照射就可在跑膠的同時觀察DNA/RNA遷移的便捷電泳系統,是目前分離DNA最快的方法,也是觀察DNA遷移的最佳方法。這種革命性的新工具可在2-7分鐘內分離多達32個樣品,可檢測到平時1/5的DNA上樣量,既節省時間又節省金錢。其應用範圍含分子生物學、基因編輯、診斷、測序、PCR產物和限制性片段的分析及回收等。
2. FlashGel閃膠系統組成
FlashGel閃膠系統由電源、特製非紫外光凝膠影象採集系統、特製高壓電泳槽、浸泡在電泳緩衝液中的預製膠及內含發光染料的上樣緩衝液loading dye組成。
FlashGel電源:用於FlashGel Dock和大多數標準的水平和垂直電泳系統,300 V電壓,程式設定簡單,大小僅為許多標準電源的一半,節省空間。
FlashGel相機:採用封閉式遮光罩直接從FlashGel系統捕獲資料,不需暗室和紫外線,在幾分鐘內安全地完成分離和記錄,可透過USB直接連線到電腦。
FlashGel電泳槽:FlashGel系統的基礎,是執行FlashGel Cassette所必需的。內建透照儀,高壓電泳遷移速度快,可見光照明無需護眼即可安全地實時觀察。可以單獨購買,也可以作為套件的一部分購買。
FlashGel Cassettes:FlashGel系統的重要組成部分,提供封閉的一次性預製瓊脂糖凝膠,無需製備凝膠和緩衝液,減少使用者潛在危害及汙染,適用範圍廣泛,DNA 10bp–10kb;RNA 0.5kb–9kb,是理想的樣品篩選工具。
3. FlashGel閃膠系統特點
快速---採用275V電壓進行高壓分離,只需2-7分鐘即可完成大於10 bp DNA片段的分離,5-10分鐘即可完成片段回收;8分鐘內完成RNA樣品的分離,10-20分鐘可完成拍照,是目前最快的電泳分析系統。
靈敏---FlashGel染料靈敏度是EB的5-20倍,可清晰檢測到0.1ng的DNA,或10ng的total RNA,因此可減少上樣體積,從而節省寶貴的樣本。並且FlashGel RNA Cassettes針對性能和純度設計,完全封閉凝膠、染色劑和緩衝液,保護樣品免受RNase的汙染。
高效---擁有出色的解析度,不到5分鐘可見條帶乾淨清晰,樣品通道筆直且均勻。
便捷---提供預製分析膠盒和回收膠盒,不需要配製凝膠和緩衝液,也不需要切膠和純化即可回收DNA,只需將膠盒放入電泳槽中,混合樣品和loading dye進行上樣,即可開始跑膠,實時觀察條帶分離過程。另外無需暗房和紫外線,FlashGel Camera系統透過一個封閉式遮光罩的數碼相機,可USB連線電腦,透過螢幕觀察DNA遷移,並5min內完成凝膠影象的採集。
安全---無需紫外光照射,可裸眼實時觀察跑膠情況並避免DNA損傷,方便地操作片段回收。
4. FlashGel閃膠系統操作步驟
DNA/RNA分析步驟
取出FlashGel預製膠盒,插入電泳槽,用水充滿點樣孔,上樣,插上電源開啟燈和開關,觀察片段遷移情況,當分離程度達到預期(根據片段大小,部分樣本2min完成),停止電泳,用FlashGel Camera拍照存檔即可。
DNA回收步驟
取出FlashGel回收預製膠盒,正常上樣、跑膠,當樣品遷移到第二排膠孔處,停止電泳,透過移液器向膠孔中加入FlashGel回收緩衝液並從孔中吸出DNA。
FlashGel系統DNA回收特點:
從上樣到回收僅需5分鐘
直接從盒中回收樣品,無需條帶切除或額外純化
在沒有紫外線的情況下視覺化樣品回收
回收效率達80-100%
不含抑制劑,為後續的再擴增、克隆或其他技術做好準備