摘要:
文題釋義:
凝膠:是高分子物質在一定條件下形成的具備空間網狀結構的膠體物質,是一種特殊的分散體系,不具備流動性。凝膠製備通常透過交聯來實現,常用作創傷敷料、藥物載體和細胞載體等。
肝向分化:指幹細胞向肝細胞方向分化,使細胞具備成為肝細胞的可能。
背景:體外人工肝系統已成為臨床上非常有效且實用的肝衰竭治療手段,但仍存在細胞來源有限和獲得細胞的功能有限等問題。
目的:最佳化和篩選符合細胞生長需要的明膠-膠原複合凝膠,以複合凝膠為細胞生長的基底材料,探究誘導骨髓間充質幹細胞肝向分化的方案。
方法:將明膠溶液與膠原溶液按照不同的體積比(1∶1、2∶1、4∶1)混合,分別製備明膠質量濃度為50,100,150,200 g/L的明膠-膠原複合凝膠,透過熔點、微觀形貌、吸水率和孔隙率篩選溶液的體積比與明膠的質量濃度,進行後續實驗。將大鼠骨髓間充質幹細胞接種於複合水凝膠中(實驗組),以單獨培養的細胞為對照,採用CCK-8法檢測細胞增殖;採用兩階段分步誘導方案來誘導兩組大鼠骨髓間充質幹細胞的肝向分化,於誘導培養的3,7,14,21 d檢測上清中白蛋白與尿素的水平。
結果與結論:①對比熔點、微觀形貌、吸水率和孔隙率檢測結果,當明膠溶液與膠原溶液按照4∶1體積比混合、明膠質量濃度為150 g/L時製備的複合凝膠最適宜用於細胞培養。②CCK-8檢測顯示,實驗組培養1,3,5 d的細胞增殖活性低於對照組,此後兩組間的差距逐漸減小,至10 d時已無差異。③肝向誘導分化實驗顯示,隨著誘導時間的延長,兩組白蛋白合成量逐漸增加,其中實驗組14,21 d的白蛋白合成量高於對照組(P < 0.05);兩組誘導3-7 d內的尿素分泌量增幅較大,7 d後生成量趨於穩定,實驗組14,21 d的尿素分泌量稍高於對照組,但差異無顯著性意義(P > 0.05)。④結果表明,以明膠-膠原複合凝膠為細胞生長的基底材料聯合誘導因子可誘導大鼠骨髓間充質幹細胞分化為肝樣細胞。
縮略語:1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺:1-ethyl-3-(3-dimethyl aminopropyl) carbodiimide,EDC;N-羥基琥珀醯亞胺:N-hydroxysuccinimide,NHS
https://orcid.org/0000-0003-2669-2028 (牛旭鋒)
中國組織工程研究雜誌出版內容重點:生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 奈米材料; 緩釋材料; 材料相容性;組織工程
關鍵詞: 複合水凝膠, 人工肝, 骨髓間充質幹細胞, 肝細胞, 誘導分化, 明膠, 膠原, EDC/NHS
引用本文: 袁伊航, 徐夢浛, 牛旭鋒. 明膠-膠原複合凝膠聯合誘導因子調控大鼠骨髓間充質幹細胞的肝向分化[J]. 中國組織工程研究, 2022, 26(16): 2510-2515.
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