不同樣本胰島素的精準定量對胰島素分泌的臨床前研究至關重要。 目前的檢測方法依然依賴於傳統的ELISA方法。多年來，研究人員一直在尋找一種理想的胰島素檢測方法，它能將特異性、靈敏度、準確性、低樣本消耗和易用性結合起來。
HTRF技術胰島素定量分析線，旨在顯著縮短檢測時間、減少樣本消耗和胰島素定量的成本。以下所有的檢測方法都已在胰島素釋放的相關細胞模型上得到驗證，並且它們與已建立的方法具有高度的相關性。
HTRF技術使用兩種單克隆抗體的三明治夾心免疫分析法，一種用供體熒光團標記，另一種用受體熒光團標記。獲得的FRET訊號強度與樣品中胰島素濃度成正比。該方法設計方便使用，不需要冗長的提取程式或樣品預處理，也不需要任何洗滌步驟。只需新增檢測試劑並讀取。
實驗流程與ELISA對比如下圖所示：
Insulin Mouse Serum Assay Kit
下面要講的胰島素小鼠血清檢測試劑盒在血清和血漿樣本中胰島素的精準定量中呈現出高度特異性和敏感性。該方法建立在一個均相檢測方案上，不需要任何洗滌和分離。
實驗結果展示：
特異性：只檢測胰島素，而不檢測與胰島素相關的多肽。靈敏度：0.064 ng/mL。線性範圍：0.24 to 8 ng/mL。
下面是驗證實驗結果展示：
1、正常小鼠血清樣本，禁食過夜或正常餵養的C57BL/6J小鼠的血清。
2、糖尿病小鼠血漿樣本，雄性小鼠心臟穿刺採集樣本，用K3 EDTA製備血漿。db/db糖尿病患者或db/+對照組，禁食過夜。
3、與ELISA的相關性。HTRF小鼠胰島素血清檢測顯示，低滴度和高滴度的血清與化學發光和比色ELISA具有極好的相關性，R²=0.979和R²=0.913。
Insulin High Range Assay Kit
在實驗中遇到高濃度的樣本時，通常需要在胰島素定量之前進行稀釋，這是一個繁瑣的步驟，可能會導致檢測結果不準確，並延長得到結果的時間。由於HTRF技術在胰島素定量前沒有洗滌步驟且動態範圍達到4log，Insulin High Range Assay Kit減少了樣本稀釋並提高了高濃度樣本島素定量的準確性。
試劑盒結果展示：
靈敏度：0.036 ng/mL。線性範圍：0.61 to 150 ng/mL。
驗證實驗結果展示如下圖：
1、MIN6小鼠 β 細胞和INS-1E大鼠 β 細胞經培養後，KRBbuffer刺激細胞10min、30min和2h並在葡萄糖濃度增加時曲線變化並得到EC50分別為：0.0087M、0.0097M和0.0063M。
2、與RIA方法相關性良好，R2=0.911。
Insulin Ultra Sensitive Assay Kit
HTRF胰島素超靈敏分析法的靈敏度約為4pg/mL，它在設計時考慮到了寶貴的樣品經濟效益，並允許顯著減少每次測試所需樣本量。
驗證實驗結果展示如下圖：
1、從C57BL/6N雄性小鼠中分離出胰島。胰島分配在2.8mM或16.7mM葡萄糖的KRB緩衝液中孵育。在孵育10分鐘（左）或30分鐘（右）後，收集上清檢測到的胰島素濃度。
2、與RIA方法相關性良好，R2=0.946。
使用HTRF平臺測量胰島素，比起傳統 ELISA 技術具有巨大的優勢。HTRF提供了ELISA的特異性、靈敏度和準確性，但是檢測時間和樣本需求量大幅度減少。
Insulin Mouse Serum Assay Kit是在寶貴的血清樣本中胰島素定量的理想選擇。4log動態範圍的Insulin High Range Assay Kit避免了高濃度樣本稀釋。高靈敏Insulin Ultra Sensitive Assay Kit甚至可以在難以測量的樣本中檢測到最低濃度的胰島素。
