多色流式實驗的意義
流式多色實驗幫助研究者得到更精細的細胞分群和更精準的細胞特性分析。鑑於多色流式在科研中應用越來越廣泛,多色流式實驗結果和機器的直接相關性和緊密性,我們必須充分了解流式細胞儀,根據流式細胞儀的效能引數,試劑特性,抗原表達特點,來設計符合實驗目的的最優流式實驗方案,提高流式資料可靠性與準確性。
BD流式細胞儀
BD FACSCanto 3鐳射10色 BD LSR Fortessa X-20 5鐳射18色
BD FACSVerse 3鐳射8色 三角和八角檢測器
1、機器試劑一站式解決方案第一步:充分了解流式細胞儀
流式細胞儀的狀態(Cytometer Performance)直接關係多色流式的結果,所以機器的日常維護和質控是非常重要的。
Initial Setup of a Cytometer
Daily Workflow
讓我們先從解讀機器質控報告 Cytometer Setup & Tracking(CST)Report 開始瞭解機器。
• rSDEN:Robust standard deviation of electronic noise ;
• Qr:Relative detection efficiency for each detector;
• Br:Relative optical background;
• rCV:Robust coefficient of variation for each setup bead;
Cytometer Performance-CS&T
2. 機器試劑一站式解決方案第二步:不能不瞭解的引數
解析度(Resolution):衡量流式細胞儀區分弱染色訊號和未染色訊號程度的引數
染色指數(Stain Index):不同熒游標記抗體在特定機器上解析度的度量標準
3. 機器試劑一站式解決方案第三步:設計panel,最佳化panel
人外周血8色T細胞Panel設計
流式細胞儀:BD canto II 4 Blue-2 Red-2 Violet
檢測指標: CD3 CD4 CD8 CD25 CD127 CD45RA CD27 CCR7
Panel最佳化前後對比:
BD HorizonTM 新熒光
BD HorizonTM Brilliant Blue 515:
點亮您的藍鐳射,FITC 通道的最佳替代染料
亮度約是FITC 的7 倍,和PE 通道有更小的溢漏
BD HorizonTM PE-CF594:
以亮度上的絕對優勢,可替代PE-Texas Red /ECD/PE-Alexa Fluor 610
BD HorizonTM Brilliant Violet 家族:
讓您的紫鐳射充分執行起來
BV421 BV510 BV605 BV650 BV711 BV786 BV421
比PE 更亮,弱表達抗原的第一選擇,可替代BD HorizonTM V450, eFluor450,Pacific BlueTM
BD HorizonTM Brilliant UltraViolet :
355 鐳射管的新選擇
BUV395 BUV496 BUV661 BUV737 BUV805
BD多色流式應用工具:
{熒光光譜檢視器}
{多色線上panel 設計工具}
{激發和發射光譜檢視器}
{可供參考流式Panel}
多色流式的目的:讓可得更多,讓可見更清晰。優寧維以專業的技術服務團隊為您提供機器試劑一站式解決方案,深入挖掘流式的精髓,為您的SCI文章保駕護航。