摘要:
文題釋義:
角蛋白6B:角蛋白6B基因位於染色體12q13,由9個外顯子組成,其編碼的蛋白是Ⅱ型角蛋白家族中的一員,屬於高分子量角蛋白。
CD44:是一種跨膜糖蛋白,其基因位於11號染色體上,轉錄後經過選擇性剪下形成多個異構體,其中包括CD44v6。CD44在多種惡性腫瘤中異常表達,尤其在腫瘤幹細胞中表達升高。
背景:膀胱癌幹細胞參與促進膀胱癌的術後復發及耐藥性,而多項研究表明角蛋白6B參與多個不同型別腫瘤的發生和進展,並與腫瘤的預後密切相關。
目的:觀察角蛋白6B在CD44+膀胱癌幹細胞中的表達差異及其對膀胱癌幹細胞增殖、遷移及自我更新的影響,並進一步探討角蛋白6B表達對膀胱癌患者預後的影響。
方法:①使用免疫磁珠分選法分選出人CD44+ 5637膀胱癌幹細胞,使用RT-PCR檢測分選後的相關乾性基因SOX2,OCT4和NANOG的表達,採用體外腫瘤球形成實驗進一步驗證CD44+細胞具有腫瘤幹細胞的自我更新能力,RT-PCR檢測CD44+膀胱癌幹細胞中的角蛋白6B的表達情況;②將CD44+ 5637膀胱癌幹細胞分為2組,其中角蛋白6B沉默組將角蛋白6B小干擾RNA轉染至分選後的CD44+膀胱癌幹細胞,未轉染的CD44+膀胱癌幹細胞作為空白對照組,轉染2 d後收集細胞,分別用平板克隆實驗、劃痕實驗和體外腫瘤球形成實驗檢測角蛋白6B沉默後膀胱癌幹細胞的增殖,遷移和自我更新能力;③採用免疫組織化學染色檢測膀胱癌患者24例膀胱腫瘤組織切片的角蛋白6B和CD44v6的表達;④利用ONCOMINE資料庫比較膀胱腫瘤組織中角蛋白6B的表達情況對患者總生存率的影響。
結果與結論:①分選後的CD44+細胞中相關乾性基因(SOX2,OCT4,NANOG)和角蛋白6B表達高於CD44-細胞(P < 0.05),其細胞增殖,遷移和體外成球能力顯著升高(P < 0.05),角蛋白6B小干擾RNA可下調角蛋白6B在CD44+膀胱癌幹細胞中的表達(P < 0.05);②與空白對照組相比,角蛋白6B小干擾RNA轉染後的CD44+膀胱癌幹細胞增殖和遷移能力顯著降低(P < 0.05),腫瘤球的數量明顯降低(P < 0.05),而Notch1和Hes1 mRNA表達升高(P < 0.05);③角蛋白6B與CD44v6在患者膀胱癌組織中的表達差異有顯著性意義(P=0.006),其中角蛋白6B高表達的膀胱癌患者總生存率低於角蛋白6B低表達的患者;④上述資料證實,角蛋白6B可在CD44+膀胱癌幹細胞中可高度表達,並且促進膀胱癌幹細胞的增殖、遷移和自我更新,角蛋白6B高表達有助於膀胱癌患者生存情況的改善。
https://orcid.org/0000-0002-1365-3073 (Yang Yuming)
中國組織工程研究雜誌出版內容重點:幹細胞;骨髓幹細胞;造血幹細胞;脂肪幹細胞;腫瘤幹細胞;胚胎幹細胞;臍帶臍血幹細胞;幹細胞誘導;幹細胞分化;組織工程
關鍵詞: 幹細胞, 膀胱癌幹細胞, 角蛋白6B, 膀胱癌, siRNA, 自我更新, 免疫磁珠, 成球實驗
引用文字:劉 璐, 楊宇明, 商艾晨, 劉 翠, 孫 策, 王 靜. CD44+膀胱癌幹細胞中角蛋白6B的表達和調控[J]. 中國組織工程研究, 2022, 26(1): 76-83.
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