摘要：
文題釋義：
長鏈非編碼RNA-MALAT1：MALAT1促進骨髓間充質幹細胞生存和血管形成，其受缺氧因素的調控，在缺氧條件下表達上調。研究顯示MALAT1能夠透過競爭性內源性RNA調控微小RNA(miRNA)的表達，進而影響骨髓間充質幹細胞的生物學行為。
微小RNA-195(miR-195)：miRNA與骨髓間充質幹細胞生存和血管形成密切相關。miR-195被證實是骨髓間充質幹細胞生存和血管形成的一個負向調控因子，它能夠促進骨髓間充質幹細胞的衰老，削弱其生存和抗凋亡能力，並對血管形成具有抑制作用。
背景：研究表明，缺氧預處理能夠促進骨髓間充質幹細胞生存和血管形成，但具體機制未完全明確。長鏈非編碼RNA-MALAT1(MALAT1)和microRNA-195(miR-195)均被證實與骨髓間充質幹細胞生存和血管形成密切相關，MALAT1促進骨髓間充質幹細胞生存和血管形成，而miR-195是骨髓間充質幹細胞生存和血管形成的負向調節因子。
目的：體外探討缺氧預處理是否透過啟用MALAT1靶向抑制miR-195進而提高骨髓間充質幹細胞生存和促血管形成能力。
方法：將體外培養的骨髓間充質幹細胞分為以下6組：常氧組(體積分數為20% O2)、缺氧組(體積分數為1% O2)、缺氧+si-MALAT1組、缺氧+
si-MALAT1對照組、缺氧+miR-195組和缺氧+miR-195對照組，其中缺氧+si-MALAT1組和缺氧+si-MALAT1對照組細胞分別轉染MALAT1 siRNA以及scramble陰性對照，再進行缺氧處理，缺氧+miR-195組和缺氧+miR-195對照組細胞分別轉染miR-195模擬物及陰性對照，再進行缺氧處理。各組培養24 h後檢測細胞增殖、凋亡以及血管腔樣結構形成情況，qRT-PCR檢測MALAT1和miR-195的表達。在上述基礎上，透過生物資訊學網站RegRNA 2.0預測MALAT1 與miR-195的潛在結合位點，將MALAT1野生型和突變型質粒分別與miR-195模擬物以及陰性對照在293T細胞中共轉染，透過檢測各組螢光素酶活性對MALAT1與miR-195的靶向關係進行驗證。
結果與結論：①與常氧組相比，缺氧組細胞生存力顯著增強，凋亡率明顯減少，血管腔樣結構數量增多(P < 0.01)，MALAT1表達升高，miR-195表達降低(P < 0.01)；②與缺氧組和缺氧+si-MALAT1對照組比較，缺氧+si-MALAT1組細胞生存力顯著降低，凋亡率明顯增加，血管腔樣結構數量減少(P < 0.01)，MALAT1表達下降，miR-195表達升高(P < 0.01)；與缺氧組和缺氧+miR-195對照組比較，缺氧+miR-195 組細胞生存力顯著降低，凋亡率明顯增加，血管腔樣結構數量減少(P < 0.01)，MALAT1表達明顯下降，miR-195表達升高(P < 0.01)；③雙螢光素酶檢測結果顯示：與miR-195對照組和空白對照組相比，miR-195組MALAT1野生型報告基因的螢光素酶活性顯著降低，下降約63%(P < 0.01)，而miR-195組、miR-195對照組以及空白對照組的螢光素酶活性在MALAT1突變型中均無明顯差異性(P > 0.05)；④結果表明，缺氧預處理能夠透過啟用MALAT1靶向抑制miR-195提高骨髓間充質幹細胞的生存和促血管形成能力。
https://orcid.org/0000-0003-0492-2216(侯婧瑛)
中國組織工程研究雜誌出版內容重點：幹細胞；骨髓幹細胞；造血幹細胞；脂肪幹細胞；腫瘤幹細胞；胚胎幹細胞；臍帶臍血幹細胞；幹細胞誘導；幹細胞分化；組織工程
關鍵詞: 幹細胞, 骨髓間充質幹細胞, 缺氧, 預處理, 血管形成, miR-195
引用文字：侯婧瑛, 郭天柱, 於萌蕾, 龍會寶, 吳 浩. 缺氧預處理透過啟用MALAT1靶向抑制miR-195促進骨髓間充質幹細胞的生存和血管形成[J]. 中國組織工程研究, 2022, 26(7): 1053-1059.
閱讀更多請登入《中國組織工程研究》雜誌官網
