鹽酸胍,分子式CH5N3·HCl,是一種強效離液劑,不僅可以作用蛋白的變性及其後續復性,還能促進疏水性分子溶解性。性質易溶於水和乙醇,水溶液呈中性,可以用作醫藥、農藥、染料及其它有機合成物的中間體,是製造磺胺類藥物及葉酸等藥物的重要原料。
但由於無紫外吸收和易電離的特點,鹽酸胍在反相液相色譜上分離檢測較為困難。微源實驗室利用文獻資料和自有裝置利用混合基質色譜柱和CAD對鹽酸胍進行了分離檢測實驗,按照以下設定色譜條件進行測定,
色譜柱 |
DionexTrinityP1,3.0*100mm,3μm |
柱溫 |
30°C |
流動相(A:B=30:70) |
A:乙腈,B:0.02M醋酸銨溶液,pH=5 |
流速 |
1mL/min |
進樣體積 |
0.8µL |
檢測器 |
CoronaCADUltra(電霧式檢測器) |
霧化溫度 |
25℃ |
精確量取鹽酸胍25mg,去離子水定容,調配成濃度為5mg/mL標準儲備溶液後分別稀釋配置為0.05、0.25、0.5、1.0、2.0mg/mL梯度濃度的標準工作溶液,待色譜分析。樣品經高速離心後,取上清液過濾,放置預備進樣。最終譜圖如下:
對樣品採用外標法定量處理後進樣測定,得出結果為0.49mg/mL。加標回收實驗,回收率結果為大於99.5%。
該方法相對操作簡單,經過實驗操作驗證穩定好、靈敏度高,選擇性強,可以適用藥物生產過程中鹽酸胍含量的檢測,加標回收率符合要求。