科沿有道擁有成熟高效的TALEN及CRISPR/Cas9基因敲除技術平臺、完善的模式生物構建平臺,完美整合從載體設計、構建、活性鑑定、基因突變動物模型建立等各個環節。科沿有道小鼠、大鼠等模式生物基因敲除技術服務,為客戶提供週期短、價效比高的模式生物構建服務。
一、TALEN靶向敲除基因原理簡介:
TALE技術(Transcription activator-like effectors)是一種嶄新的分子生物學工具。科學家發現,來自植物細菌Xanthomonassp的TAL蛋白的核酸結合域的氨基酸序列與其靶位點的核酸序列有恆定的對應關係。利用TAL的序列模組,可組裝成特異結合任意DNA序列的模組化蛋白。TALEN(Transcription activator-like effector(TAL) nucleases)技術是基於TALE與人工改造的核酸內切酶的切割域(FokI)構建針對任意特定核酸靶序列的重組核酸酶。透過TAL的DNA識別域結合到靶位點上,及FokI切割域形成二聚體後,可特異性對目標DNA序列實現切斷。在隨後的非同源末端連線修復過程中,斷開的DNA雙鏈會由於鹼基的隨機增減從而以一定的機率實現目標基因功能的缺失。
二、CRISPR/Cas9靶向敲除基因原理簡介:
CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是一種由RNA指導Cas核酸酶對特定基因序列進行DNA修飾的技術。CRISPR/CRISPR-associated(Cas)是細菌和古細菌一種不斷進化適應的免疫防禦機制。在這系統中,CRISPR對特定DNA的識別是由crRNA或嚮導RNA透過鹼基互補配對,定向尋找目標DNA序列。靶定目標序列後,Cas9蛋白負責對目標DNA進行剪下,造成靶DNA雙鏈斷裂。在隨後的非同源末端連線修復過程中,斷開的DNA雙鏈會由於鹼基的隨機增減從而以一定的機率實現目標基因功能的缺失。
三、TALEN/CRISPR構建基因敲除鼠技術流程圖:
四、科沿有道專案服務流程:
五、實驗步驟及週期:
北京科沿有道生物科技有限公司,專注於生命科學最前沿科研技術服務,具有較好的生物學和醫學技術服務平臺,能夠提供實驗課題設計、論文編輯潤色,以及細胞實驗、動物模型、病理檢測、分子實驗、免疫檢測、病毒包裝、組學服務、基因編輯等整體課題一站式服務。
科沿有道秉承“客戶為先,服務至上”的經營理念,以一切為了客戶的利益為宗旨,努力為廣大客戶提供最優質、高效的服務,科沿有道人用實實在在的優質實驗技術換取客戶的信任,相信在未來的工作中,科沿有道人一定能夠成為您的得力助手和值得信賴的合作伙伴。