由於生物細胞通常是無色透明的,它對光沒有太大的吸收,導致它在傳統光學顯微鏡下的對比度非常低,但是由於它內部結構存在差異導致它的折射率分佈是不均勻的,從而光在經過細胞不同位置時存在光程差異,這部分資訊稱為相位資訊。
由於當前的傳統相機只能記錄強度資訊,相位資訊不可避免地丟失掉了。反過來,得益於相位(深度)資訊的缺失,在宏觀上我們也可以利用這一性質實現手捧太陽等效果,術語稱為“透視攝影”。
依次為透視攝影的兩個示例,無色透明細胞傳統成像示例和像襯後的相位成像結果
對於無色透明生物細胞,可以想到,最為直接的觀察方法是對樣品進行染色,形成足夠大的對比度或產生不同的光譜,從而達到成像目的,包括使用化學染料或者熒游標記。譬如在中學時,我們都在顯微鏡下觀察過洋蔥表皮細胞,就是使用的品紅染料。
為什麼要用LED照明,大家都知道LED比較節能。但實際上LED還有一個很好的效果,它能夠通過幾個簡單的基色就能將顏色混得更為豐富,創造出五彩繽紛的世界。
近日,中國科學院西安光學精密機械研究所馬彩文研究員、姚保利研究員、潘安副研究員團隊就提出一種用LED照明的基於彩色傳遞的快速全綵色顯微成像方法,簡稱CFPM,使得彩色化效率相比於傳統方法實現飛躍。7月27日,該成果以封面文章線上刊發於SCIENCE CHINA Physis, Mechanics & Astronomy2021年第11期。
我們都知道,有很多經典的老照片,受限於過去的技術,只能以黑白的形式傳世。儘管黑白照片別有一番風味,但是彩色照片有時候能給人更強的代入感。這種給照片新增不同濾鏡上色的方法,術語稱為顏色匹配。所謂顏色匹配,就是將施主影象的色調資訊傳遞到受主影象上,使得受主影象擁有與施主影象相同的“顏色風格”,進而也能使平常人“畫”出梵高風格的畫。
受這一思路啟發,彩色傳遞思想的獨特之處則是將原先R/G/B三通道變為兩通道模式——黑白亮度影象和彩色紋理資訊,將原先三通道里亮度(灰度)資訊與彩色紋理資訊相分離,透過用LED照明獲取低解析度彩色影象,並將其彩色資訊傳遞到高解析度黑白(灰度)的受主影象上,使得受主影象同時擁有高解析度和彩色紋理。
彩色傳遞思想。(a)顏色匹配: 傳遞色調資訊; (b)彩色傳遞: 傳遞彩色紋理資訊。
談及未來的應用,論文作者表示:“透過把光學顯微鏡低解析度的真彩色紋理資訊傳遞給電子顯微鏡,該方法也啟示我們可以為電鏡的黑白影象染上真彩色”。
來源:中國科學院西安光學精密機械研究所