在1960年代末、1970年代初發現乾燥綜合徵、紅斑狼瘡相關抗體。1979年,各個實驗室相互驗證,最後證實兩個疾病裡有一些相同的抗原-抗體系統。
這其中就有《抗SSA抗體》,另一個就是今天討論的抗SSB抗體。
一,抗SSB抗體所對應的抗原
抗SSB抗體對應的是La/SSB 抗原。它是一個跨物種的高度保守蛋白。我們在牛、兔、小鼠、大鼠、甚至在果蠅、釀酒酵母菌等生物體可找到。
它廣泛表達在所有組織,其分子量是47kD。在細胞核、細胞漿內都可以找到它,但主要是在細胞核內。
La/SSB 抗原蛋白是一種與RNA結合蛋白。它的生物學作用就是基於這點。比如,參與調節細胞增殖、腫瘤的發育。另外,它還可以干擾RNA病毒的侵入。
很顯然,La/SSB 抗原蛋白的高度保守的特徵帶來一個好處:可以透過其他物種的細胞系做蛋白提取。而抗SSA抗原蛋白則最好選擇人類細胞系做蛋白提取。
過去選擇牛胸腺細胞做提取,選擇分層法,或者親和層析法來分離並純化該蛋白。今天還可以用基因改造過的細菌來分泌表達La/SSB 抗原蛋白,然後再做提取並純化。
二,抗SSB抗體的特徵
目前認為La/SSB 抗原蛋白有4個重要的抗原表位:
- 147~154位氨基酸
- 291~302位氨基酸
- 301~318位氨基酸
- 349~364位氨基酸
其中最後的349~364位氨基酸的抗原表位的價值最大。甚至可以替代整個抗原蛋白。
而抗SSB抗體被認為跟如下疾病有關:
- 乾燥綜合徵
- 紅斑狼瘡
- 新生兒狼瘡
- 原發性膽汁淤積性膽管炎
- 特發性炎症性肌病
- 類風溼關節炎
抗SSA抗體跟抗SSB抗體通常一起出現。但前者可以單獨出現,而抗SSB抗體很少單獨出現。兩者共同出現時,出現乾燥綜合徵、新生兒狼瘡的風險更大。
單獨出現抗SSB抗體,要小心檢驗誤差可能。
三,抗SSB抗體的檢測方法
目前有4種常用的方法來檢測抗SSB抗體。
1,RNA沉澱法(RNA precipitation):用[32P]標記抗SSB抗原蛋白,加入病人的血清、RNA;如病人有抗SSB抗體則可以出現免疫沉澱,即小RNAs沉澱物。這些沉澱物顯像而被我們觀察到。
該方法是檢驗抗SSB的金標準方法。因為它的敏感性、特異性都是最好的。但因為這屬於專業實驗室所採用的。常規的臨床實驗室很難採用。
2,對流免疫電泳法(counterimmunoelectrophoresis ,CIE):適當處理過的瓊脂板上有很多對孔,對孔裡分別加入抗SSB抗原蛋白和病人血清,這就是“抗原-抗體孔帶”。將加入抗原的孔置於負極端。然後予以適合的電壓、電流。電泳後,如病人 血清裡有抗SSA抗體,則在抗原抗體孔之間形成一條清楚緻密的白色沉澱線。
CIE法是臨床實驗室裡最常用的的可靠方法。因為其特異性幾乎是100%,而敏感性也高達89%。
3,免疫印跡法(immunoblotting ,IB):該方法其實是對CIE的改良。因為有商業化的條帶,直接跟病人的血清結合,然後再現象。
4,ELISA法:目前可選擇抗SSB抗原蛋白的349~364位氨基酸做固定。然後加入病人的血清、顯像熒光。如病人的血清裡有抗SSB抗體,則可以熒光顯像。
上述方法的敏感性、特異性都較好。少數提示檢驗有誤的情況(例如抗SSA陰性而抗SSB陽性)可用RNA沉澱法做複檢。
參考資料:
1,《Dubois’ Lupus Erythematosus and Related Syndromes》( 第9 版)
2,《Systemic Lupus Erythematosus:Basic, Applied and Clinical Aspects》(第2版)
3,Uptodate 臨床顧問
4,《Autoantibodies》(第3版)