細胞劃痕癒合法是測定細胞遷移運動與癒合能力的方法,類似體外傷口癒合模型,在體外培養皿或平板培養的單層貼壁細胞上,用微量槍頭或其它硬物在細胞生長的中央區域劃線,去除中央部分的細胞,然後繼續培養細胞至實驗設定的時間,取出細胞培養板,觀察周邊細胞是否生長(修復)至中央劃痕區,以此判斷細胞的生長遷移及修復能力。
特點:
1. 在一定程度上模擬了體內細胞遷移的過程。
2. 非常適合研究細胞與胞外基質(ECM),細胞與細胞之間相互作用引起的細胞 遷移。
3. 與包括活細胞成像在內的顯微鏡系統相容,可用於分析細胞間的相互作用。
4. 研究細胞遷移的體外實驗中最簡單的方法。
傳統實驗方法 實驗步驟:
1. 培養板接種細胞之前先用marker筆在12孔板背面畫橫線標記(方便拍照時定位同一 個視野)。
2. 細胞消化後接入12孔板,數量以貼壁後鋪滿板底為宜(數量少時可培養一段時間至鋪滿板底)。
3. 細胞鋪滿板底後,用1 ml槍頭垂直於孔板製造細胞劃痕,儘量保證各個劃痕寬度一致。(人工槍頭製造劃痕難以保證劃痕寬度的一致性,影響實驗結果,這也是該方法最大的缺陷。)
4. 吸去細胞培養液,用PBS沖洗孔板三次,洗去劃痕產生的細胞碎片。
5. 加入無血清培養基,拍照記錄。
6. 將培養板放入培養箱培養,每隔4-6小時取出拍照。
7. 根據收集圖片資料分析實驗結果。
